资料介绍
动物细胞工程概述:本章重点和难点:
了解动物细胞特性及其培养特点,充分认识动物细胞工程在疾病诊断和治疗中的应用前
景。
第一节、动物细胞特性
一、动物细胞与植物细胞比较
二、动物细胞在活体内的特性
动物细胞在胚胎期即已高度分化,而且这种分化是不可逆转的,
活体内的动物细胞按照分裂能力可以分为三大类:第一类是能保持继续分裂能力的细
胞;第二类细胞群是永久失去分裂能力的细胞;第三类是静止细胞群,即所谓的G0细胞。
三、培养条件下动物细胞的生长特性
离体培养的动物细胞可分为两类:贴壁依赖型(anchorage-dependent)、贴壁非依赖型
(anchorage-independent)和间性贴壁细胞。
四、培养条件下动物细胞的生理特点
1、动物细胞的分裂周期长
各类细胞分裂周期时间表
细 胞 类 别 细胞周期时间(h)
G1 S G2 M 合 计
人胚肺成纤维细胞(WI-38) 8 8.0 4.0 0.8 20.8
人T 细胞 10.5 7.6 3.2 0.8 21.1
小鼠腹水癌细胞 5.7 8.5 3.8 1 19
中国仓鼠卵巢细胞(CHO) 4.7 4.1 2.8 0.8 12.4
急性淋巴性白血病细胞 1~10d 20 2~3d 1.0 2~20d
2、有限细胞系和永久细胞系
动物细胞离体培养起始物,我们称之为原代培养(primary culture)。经继代培养后即成
为有限细胞系(finite cell line)。
大多数细胞系在有限的代数内以不变的形式增殖,当超过有限世代后,它们可能有两种
情况,一是衰老死亡,二是发育成永久细胞系或称连续细胞系。
有限细胞系转换成永久细胞系的过度期称为转换期(crisis),其转换过程在动物细胞培养
中称为体外转化(in vitro transformation)。
永久细胞系有如下特征:细胞形态变化,如细胞变小,黏附性减少,具有较高的核质
比;生长速率增加,倍增时间缩短;对血清的依赖性减小;贴壁依赖性降低;细胞异倍
体和非整倍体增加,细胞接种到体内后,生癌率上升。
3、动物细胞的环境敏感性
第二节、动物细胞培养的环境与营养要求
一、动物细胞培养的环境要求
1、温度
2、pH
3、溶氧及气体环境
4、渗透压
二、动物细胞的营养需求
1、天然培养基
其优点是营养成分丰富、培养效果好;缺点是成分复杂、个体差异大、来源有限。
天然培养基的种类主要包括生物性体液(如血清)、组织浸出液(如胚胎浸出液)、凝
固剂(如血浆)、水解乳蛋白等。
2、合成培养基
合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质对细胞体内生存环境中已知物质在体
外人工条件的interwetten与威廉的赔率体系 ,经过反复试验筛选、强化和重新组合后形成的培养基。
合成培养基的优点:既能给细胞提供一个近似于体内的生存环境,又便于控制和提供标
准化体外生存环境。
合成培养基的主要成分:氨基酸、维生素、糖类、无机离子和其它辅助成分。
§3、动物细胞工程的主要威廉希尔官方网站 及其实践意义
一、单克隆抗体威廉希尔官方网站 在现代医学中的应用
单克隆抗体威廉希尔官方网站 的核心是用骨髓瘤细胞(myeloma cell)与经特定抗源免疫刺激的B淋巴细
胞(antigen stimulated B lymphoblast)融合得到杂交瘤细胞(hybridoma cell),杂交瘤细胞既能象
骨髓瘤细胞那样在体外无限增殖,又具有B淋巴细胞产生特异性抗体的能力。因此,单克隆
抗体威廉希尔官方网站 又称为杂交瘤威廉希尔官方网站 (hybridoma technology)。
单克隆抗体具有高度的特异性与灵敏性,可以广泛地由于临床医学的疾病诊断,以提高
疾病诊断的准确性。
利用单克隆抗体威廉希尔官方网站 可以生产各种免疫疫苗,这不仅能大大降低生产成本,同时也增加
了疫苗的安全性。
单克隆抗体还有可能用于某些肿瘤的治疗,是人类战胜癌症十分有望的潜在威廉希尔官方网站 。
单克隆抗体威廉希尔官方网站 还可广泛用于各种基础医学研究,从而推动现代医学的不断发展。
二、胚胎移植和核移植威廉希尔官方网站 在畜牧业中的应用
利用胚胎威廉希尔官方网站 可以以工厂形式大批量生产优质胚胎,从而可以降低胚胎成本,扩大移植
胚的来源,使农畜动物胚胎移植的推广应用成为可能。
体外受精可以准确地确定受精的时间和胚胎发育阶段,因此,利用体外受精威廉希尔官方网站 进行核
移植、性别控制和基因导入,可望工厂化生产遗传性稳定、生产性能优良的家畜,以加
快农畜良种化。
三、动物细胞大量培养生产次生产物
了解动物细胞特性及其培养特点,充分认识动物细胞工程在疾病诊断和治疗中的应用前
景。
第一节、动物细胞特性
一、动物细胞与植物细胞比较
二、动物细胞在活体内的特性
动物细胞在胚胎期即已高度分化,而且这种分化是不可逆转的,
活体内的动物细胞按照分裂能力可以分为三大类:第一类是能保持继续分裂能力的细
胞;第二类细胞群是永久失去分裂能力的细胞;第三类是静止细胞群,即所谓的G0细胞。
三、培养条件下动物细胞的生长特性
离体培养的动物细胞可分为两类:贴壁依赖型(anchorage-dependent)、贴壁非依赖型
(anchorage-independent)和间性贴壁细胞。
四、培养条件下动物细胞的生理特点
1、动物细胞的分裂周期长
各类细胞分裂周期时间表
细 胞 类 别 细胞周期时间(h)
G1 S G2 M 合 计
人胚肺成纤维细胞(WI-38) 8 8.0 4.0 0.8 20.8
人T 细胞 10.5 7.6 3.2 0.8 21.1
小鼠腹水癌细胞 5.7 8.5 3.8 1 19
中国仓鼠卵巢细胞(CHO) 4.7 4.1 2.8 0.8 12.4
急性淋巴性白血病细胞 1~10d 20 2~3d 1.0 2~20d
2、有限细胞系和永久细胞系
动物细胞离体培养起始物,我们称之为原代培养(primary culture)。经继代培养后即成
为有限细胞系(finite cell line)。
大多数细胞系在有限的代数内以不变的形式增殖,当超过有限世代后,它们可能有两种
情况,一是衰老死亡,二是发育成永久细胞系或称连续细胞系。
有限细胞系转换成永久细胞系的过度期称为转换期(crisis),其转换过程在动物细胞培养
中称为体外转化(in vitro transformation)。
永久细胞系有如下特征:细胞形态变化,如细胞变小,黏附性减少,具有较高的核质
比;生长速率增加,倍增时间缩短;对血清的依赖性减小;贴壁依赖性降低;细胞异倍
体和非整倍体增加,细胞接种到体内后,生癌率上升。
3、动物细胞的环境敏感性
第二节、动物细胞培养的环境与营养要求
一、动物细胞培养的环境要求
1、温度
2、pH
3、溶氧及气体环境
4、渗透压
二、动物细胞的营养需求
1、天然培养基
其优点是营养成分丰富、培养效果好;缺点是成分复杂、个体差异大、来源有限。
天然培养基的种类主要包括生物性体液(如血清)、组织浸出液(如胚胎浸出液)、凝
固剂(如血浆)、水解乳蛋白等。
2、合成培养基
合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质对细胞体内生存环境中已知物质在体
外人工条件的interwetten与威廉的赔率体系 ,经过反复试验筛选、强化和重新组合后形成的培养基。
合成培养基的优点:既能给细胞提供一个近似于体内的生存环境,又便于控制和提供标
准化体外生存环境。
合成培养基的主要成分:氨基酸、维生素、糖类、无机离子和其它辅助成分。
§3、动物细胞工程的主要威廉希尔官方网站 及其实践意义
一、单克隆抗体威廉希尔官方网站 在现代医学中的应用
单克隆抗体威廉希尔官方网站 的核心是用骨髓瘤细胞(myeloma cell)与经特定抗源免疫刺激的B淋巴细
胞(antigen stimulated B lymphoblast)融合得到杂交瘤细胞(hybridoma cell),杂交瘤细胞既能象
骨髓瘤细胞那样在体外无限增殖,又具有B淋巴细胞产生特异性抗体的能力。因此,单克隆
抗体威廉希尔官方网站 又称为杂交瘤威廉希尔官方网站 (hybridoma technology)。
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疾病诊断的准确性。
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单克隆抗体还有可能用于某些肿瘤的治疗,是人类战胜癌症十分有望的潜在威廉希尔官方网站 。
单克隆抗体威廉希尔官方网站 还可广泛用于各种基础医学研究,从而推动现代医学的不断发展。
二、胚胎移植和核移植威廉希尔官方网站 在畜牧业中的应用
利用胚胎威廉希尔官方网站 可以以工厂形式大批量生产优质胚胎,从而可以降低胚胎成本,扩大移植
胚的来源,使农畜动物胚胎移植的推广应用成为可能。
体外受精可以准确地确定受精的时间和胚胎发育阶段,因此,利用体外受精威廉希尔官方网站 进行核
移植、性别控制和基因导入,可望工厂化生产遗传性稳定、生产性能优良的家畜,以加
快农畜良种化。
三、动物细胞大量培养生产次生产物
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